Чем фк отличается от пфк: Ответы на часто задаваемые вопросы – ДЮСШ ПФК ЦСКА – официальный сайт ДЮСШ ПФК ЦСКА

ФК «Ростов» отличается бойцовским духом и неуступчивостью – тренер ЦСКА Овчинников

https://rsport.ria.ru/20170915/1125763147.html

ФК «Ростов» отличается бойцовским духом и неуступчивостью – тренер ЦСКА Овчинников

ФК «Ростов» отличается бойцовским духом и неуступчивостью – тренер ЦСКА Овчинников — РИА Новости Спорт, 03.09.2019

ФК «Ростов» отличается бойцовским духом и неуступчивостью – тренер ЦСКА Овчинников

Футбольный клуб «Ростов» отличается бойцовским духом, это неуступчивая команда, но ЦСКА должен проявить свои лучшие качества и победить, заявил старший тренер москвичей Сергей Овчинников перед матчем команд в 10-м туре чемпионата России.

2017-09-15T12:38

2017-09-15T12:38

2019-09-03T19:02

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdnn21.img.ria.ru/images/sharing/article/1125763147.jpg?11159888701567526552

РИА Новости Спорт

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og. xn--p1ai/awards/

2017

РИА Новости Спорт

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://rsport.ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости Спорт

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости Спорт

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости Спорт

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

спорт, сергей овчинников, российская премьер-лига (рпл), пфк цска, ростов

12:38 15.09.2017 (обновлено: 19:02 03.09.2019)

Футбольный клуб «Ростов» отличается бойцовским духом, это неуступчивая команда, но ЦСКА должен проявить свои лучшие качества и победить, заявил старший тренер москвичей Сергей Овчинников перед матчем команд в 10-м туре чемпионата России.

«Это была моя мечта…»

В ПФК «Арсенал» сформирована молодежная женская команда.

Вопрос о формировании в структуре академии женской команды был поднят в начале 2021 года. Реализовать задуманное удалось летом. В середине августа на полях Центра подготовки юных футболистов-Академия «Арсенал» прошел первый просмотр. Участие в нем приняли более тридцати кандидаток со всего региона. По итогам просмотра 14 девушек в возрасте от 11 до 14 лет зачислены в ЦПЮФ. На начальном этапе за их подготовку будут отвечать старший тренер академии Алексей Соловьев и тренер Антон Родионов.

Юные футболистки получили экипировку и приступили к работе. Тренировки проходят три раза в неделю и длятся полтора часа. По словам тренеров, сейчас главная задача девушек привыкнуть к нагрузкам и тем требованиям, которые к ним предъявляются.

Алексей Соловьев, старший тренер ЦПЮФ-Академия «Арсенал»:

— По первым тренировкам видно, что многие прошли подготовку в футбольных школах, имеют опыт выступления на турнирах и обладают футбольными навыками. Понятно, что работы нам предстоит много, но уверен, что она будет интересной. В футбольном плане занятия у девушек не отличается от тех, которые мы проводим с ребятами, но есть и нюансы. Перед тем, как приступить к тренировкам, пришлось почитать специальную литературу, пообщаться с коллегами из других клубов. Мне повезло: зимой на стажировке в Турции довелось понаблюдать за работой женской команды ЦСКА и пообщаться с главным тренером Александром Григоряном. Многое почерпнул у этого специалиста, некоторые упражнения использую в тренировочном процессе.

Анна-Мария Бозбей, футболистка ЦПЮФ-Академия ПФК «Арсенал»:

— Я шесть лет занималась плаванием, но переключилась на футбол. Год назад начала тренироваться с ребятами, на меня обратил внимание тренер и позвал в женскую команду «Тула». Летом увидела объявление, что академия «Арсенал» набирает девичью команду. Я не могла упустить такую возможность, потому что это была моя мечта — заниматься в футбольной академии.

Рада, что удалось пройти отбор. У нас очень интересные и динамичные занятия, нравится, что все упражнения проходят с мячом.

Итак, начало положено. Пожелаем юным футболисткам «Арсенала» не по дням, а по часам расти в мастерстве. И с радостью сообщаем, что 2 октября на поле стадиона академии пройдут дополнительные отборы юношей в команды 2005-2012 годов рождения и девушек 2007-2009 годов рождения. Дорога в большой футбол начинается с академии ПФК «Арсенал»!

новости ПФК ЦСКА Москва и сайта

ПОЖАЛУЙСТА! Кому не сложно, хотя бы 1-2 раза в неделю, щелкните на рекламу от гууугггллааа!

Всего оставлено комментариев к новостям: 358009

---

shipilov_ab.54 // Масалитин: «ЦСКА с такой игрой нечего делать ни в Лиге чемпионов, ни в Лиге Европы»На самом деле, НИ ОДНА из команд РФПЛ не потянет ни в ЛЧ, ни в ЛЕ. Таков, к сожалению, наш футбол сегодня. И мы еще раз убедимся в этом очень скоро — на Кубке Конфедераций. — — — — — — — — — — — — — — — — vitalik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

С ДНЁМ ПОБЕДЫ!!! Слава живым, вечная память павшим!

— — — — — — — — — — — — — — — — 1964 // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

админ похоже занят. С ДНЁМ ПОБЕДЫ, МУЖИКИ! с Великим праздником,Армейцы!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017[q334851] Привет! Растеряша… Уже давал… [email protected] — — — — — — — — — — — — — — — — volkslav // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

[q334846] Привет, друг. Скинь свое мыло, у меня тоже есть вопросы во винде 10

— — — — — — — — — — — — — — — — kvr // Рейтинг слухов РФПЛ. Новый форвард для ЦСКА

не думаю что это правда

— — — — — — — — — — — — — — — — Дружищи // Масалитин: «ЦСКА с такой игрой нечего делать ни в Лиге чемпионов, ни в Лиге Европы»

Усиление нам нужно. Но его видимо не будет. Правильно Карп когда в начале чемпа прогнозировал чемпионов, назвал свиней.

Мотивировка-они усилились, а мы и бомжи наоборот ослабли. Ну плюс пруха у них пошла. Вобщем без усиления, швах….

— — — — — — — — — — — — — — — — россия2017 // Масалитин: «ЦСКА с такой игрой нечего делать ни в Лиге чемпионов, ни в Лиге Европы»

я его не понял-блин!!!

— — — — — — — — — — — — — — — — Виктор // Рейтинг слухов РФПЛ. Новый форвард для ЦСКА

Мда…Главное достоинство игрока — «свободный агент». И это называется укрепление…Теперь нас каждым «свободным» (особенно дешевым) будут подкалывать…

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

[q334844] Не-а… Не буду.. Тут братва с форума вопросов понакидала по винде десятке. Надо подтянуть, а еще страждущим на корпоративку и офис 2016 — ключиков в личку понашвырять. Отвлекусь на часок…

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

НАЧАЛОСЬ! ШЕШНАДЦАТЬ ЛЕТ БЕЗ ПОБЕД)))!

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06. 05.2017

dobchik. Дык щас шоу ВалерияГеоргича начнется! А с учетом вчерашнего метеоризма в свинячих желудках думаю, что стоит смотреть это)!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

[q334841] Ёпрст!!! А я затылком пастухов с проводницами смотрю… Переключаемся…

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // Матчи 30-го тура чемпионата России начнутся в 15.00 по московскому времени[q334799] Как я такой «шедевр» мог пропустить, ума не приложу… Ну, начнем с того, что очень много буков, пустых, особенно в середине простыни, с притязаниями на остроумие, переходящее в ослоумие… Анализ бреда проводить не буду, ибо это стезя врачей определенной квалификации и направления… Немного замечаний. Первое — жизненный опыт, сведения и знания, полученные из уст старших родственников — бесценны. Дать в морду не патриоту Мне б такого патриота, в свое время в Чечне бы встретить, да послушать речи о патриотизме… Жаль не судьба… Прежде чем кому то грозить, что имеется возможность дать в морду, надобно ответить на уже имевшийся прямой вызов, а именно предложение от одного из юзеров встретиться в определенном месте и в определенное время. Развития событий, как я понял, не последовало, посему предлагаю не тявкать как Табаки… Покрутить у виска о словах родного дяди — это скотство, что указывает в тебе элементарного подонка и мерзавца. Историей, унитаз, не увлекаются, а изучают. С разных источников, используя анализ. Судя по твоим постам и почерпнутым «историческим данным», попытка увлечения историей неудачная. Не зачет. Советую заняться чем-нибудь другим. «…»В сарказм». Уметь В чего-то — стандартный оборот, используемый в интернете…» — ну, как человек, позиционирующий себя специалистом в области истории и с возможными претензиями на культуру в общении, надо ссылаться на имеющие правила русского языка, пользоваться ими, а не на полугоблинском сленге с инета… — — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06. 05.2017

Тьфу тьфу тьфу! Щас хоккей смотрю! Пока играют по советски! Аж глаз радуют!

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

dobchik. Не но это понятно! Пуповины роттенбергам тимченкам там перерезали. Приходится государству тут им чего то придумывать. То платона, то крымский мост! Вместо того, что б на законно наварованых деньгах строить свое светлое завтра там, как Роман Абрамыч. Своя команда, свой тренер, который обещается порвать Чемпионшип)! Что еще надо для полного счастья)!

— — — — — — — — — — — — — — — — Сизый // Андронов: обидно и за Квартальнова, и за всю команду ЦСКА обидно

Ссылка неужели Быкова поставят?!$.

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // Андронов: обидно и за Квартальнова, и за всю команду ЦСКА обидно

А интересно регулярный чемпионат куда то плюсуют?! Равнозначно чемпионству! Или регулярка — обыкновенный американский онанизм, вывезенный за пределы их острова?!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06. 05.2017[q334835] Сержант, дык разговор патриЁты ведут не о шкурке, а о мякушке внутрях А в ряды нас ужо давно поставили. Сколько сотен лет. Не забыл? Меняемся только местом в топ-5 Единственное что, некому конкретно на три буквы послать. Борзометр то при коммунистах у западников так не зашкаливал. А сейчас то буреют не по детски. Хотя откуда ноги растут ты знаешь — уж больно наши небожители завязаны на Запад — пуповину рвать то больно и затратно будет… Всёж там — и бабло и дети и недвижимость и запасные жены Это коммунячее золото партии всё ищут и ищут и никак не найдут. А здесь, пардонте, все на поверхности… — — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

А Жирика я сам люблю послушать. Настроение подымает не хуже Жванецкого)! Правда в последнее время стареть стал! Мало драйва! Вот так загнется….и партия с ним вместе)! Сынок конечно даже не жалкое подобие)!

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06. 05.2017

dobchik. Видишь ли все не так то просто! Мавзолей входит как часть московского Кремля, в культурное наследие ЮНЕСКО. И что то там 450 чудаков с мандатами по идее ни чего сделать не могут! В противном случае наша страна встанет в один ряд с сирийским игилом и Пальмирой и афганскими талибами, которые расхерачили статуи будд, высеченные в скалах! Лично мне не хочется что бы быть с ними в одном ряду)!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017[q334833] Ну, Жирика ты не трожь! Они со свиньядзе уж явно не на одной планке — один просто ненавидит коммунистов (правда был бы он тем, кто есть, не будь коммунистов — вопрос риторический — не всеж у нас, хаяльщики соввласти, из графьев, баронов да князей, не так ли?), то горский жид просто ненавидит… Всё… Советское, российское, русское… Помню как Жирик коммунистов даже хвалил во времена алкаша Бобика — помню его фразу на «сходняке» нафтегазовым простым «русским парням» — «коммунисты, хоть тонким слоем, но доходы от нефтянки размазывали по всем гражданам страны, а вы всё под себя. ..». Мавзолей? Я хоть и красный, но по мне — пусть захоронят. Место один хер освобождать надо Этим всё-равно никакие проблемы не решишь. Кости упокоишь, вот только это не выход… Декоммунизация? Угу… Верным путем пойдут товарищи… Соседи с незалежной им в пример… — — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

dobchik. Так это ни для кого не секрет! Для нормальных людей. Но не зря ж у государства в «рукаве» есть жирики/сванидзы и прочие чубайсыИ. Вот они и методично расшатывают мозги своими «открытиями»)! Тут каждую пятницу на сайте » эхо москвы» собираются «прчитатели» творчества Карлыча(Сванидзе). И ждут вспомнит ли в эту пятницу «человек с гибким позвоночником» про Иосифа Виссарионыча)))! Каждую пятницу, когда бывает, естественно Сталину достается от ярого антисталиниста! Так что долбят правду по всем статьям! На Д.Р Ленина даже Малахова подключили)))!!!!! Видать задрапированный мавзолей на майские праздники один хрен не дает спать спокойно кое кому)))!

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06. 05.2017

Унитаз. За Суммарное естественно число побед в Чемпионатах СССР плюсуешь одно очко, тому кому повезет! А то на радостях не правильно поймешь)!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

[q334830] Сержант, да мало ли что люди говорят? Вот одна людина, вернее сантехническое изделие, тут пукнуло про Черданцева. Мой ответ читал? Вот то то и оно… Тут много чего понапистят… Пару лет назад, это в тему о том, что люди говорят, смотрел на НТВ Открытое расследование. Тема власти и гнилых патриотов — Ленин как немецкий шпиЁн. Начали «торги» с 200 муллиёнов дойчмарок для вождя революции от добрых бюргеров. Потом слились на 20… потом на два… Оставался последний аргумент — шпиЁн. Открыли архивы — облом… Но периодически все равно будет всплывать. Это как тема репрессий 1937 года. Чем больше проблем в настоящем, тем больше стрелки будут переводить на прошлое… Вот так и возникают унитазы, в жизни ни куя не видевшие, но начитавшиеся всяких бредней с вики и просторов инета. .. Но понимаешь, как говорят, сколько веревочке не виться… Локоть он близок… Но…

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

dobchik. Ну так люди говорят)! Даже Вольфыч не побоялся озвучить это в СМИ!

— — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

Унитаз. Да ни я, ни кто здесь не парится по 21 году без чемпионства! Как говорится из песни слов не выкинешь)! А ты нам полную статистику по всем московским клубам впендюрил)! За чем и для чего?! Я могу предложить вот что! Возьми соотношение победных игр между московскими клубами в чемпионате СССР! Пример мясо имеет положительный балланс в играх с нами — одно очко ставишь им в +!Подсчитай и составь турнирную таблицу! Думаю что она тебя очень удивит)))!

— — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017[q334826] Глаза открываются и приходит осознание многого в двух случаях — из жизненного опыта и когда глаза откроются. Если в 39 лет этого не произошло, то клиент безнадежен… По Милонову. Латентный? Не, я так близко с ним не знаком… — — — — — — — — — — — — — — — — dobchik // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017[q334825] «…Ещё раз — не ищите жидов ни под кроватью, ни в тёмной комнате…» — — это точно… Под кроватью они проводили время в Варшаве и Познани… Теперь они обитают в других местах… Недалек тот день, когда под кроватью придется искать таких как ты… Даже шершавый язык не поможет… — — — — — — — — — — — — — — — — (Сержант) // «Амкар» — ПФК ЦСКА обсуждение матча 06.05.2017

dobchik. Ну ты же наверняка знаешь ВитВалМилонова! Вот чего он каждый год рвется 1 мая в колонну к голубым. В прошлом году они его в мусарню сдали, в этом в табло дали. В следующем…. Ведь ни для кого не секрет, что он латентный)! Так и наш Унитаз! Скорее всего надеется через пару лет превратится в золотые ясли)

— — — — — — — — — — — — — — — —

В чем разница фанеры ФК от ФСФ и как их отличить

12. 05.2018

Оба этих вида фанеры широко применяются, доступны и просты в пользовании. Сфера применения ФК и ФСФ фанеры – промышленное производство, упаковка, строительство, вагоно- и машиностроение. Универсальность материала доказана годами применения для отделки стен, полов, потолков, перегородок, конструирования, проектирования. Давайте попробуем разобраться, в чем различия фанера марки ФК от фанеры ФСФ, и как их можно отличить визуально.

Подробнее о понятиях

Если расшифровать аббревиатуры:

• Фанера ФК – это древесные плиты, проклеенные между собой карбамидоформальдегидным клеевым составом.
• Фанера ФСФ – это фанера + смоляной клей + фанера. Материал состоит из нескольких слоев шпона, прочно соединенных между собой фенолформальдегидным клеем, имеющим смолянистую основу.

Главное отличие фанеры ФК от ФСФ

ФК материал отличается универсальностью в плане применения, высокой прочностью. Не предназначена к применению в условиях повышенной влажности. Главное преимущество – дешевизна, относительно ФСФ материалов. Основная сфера применения – обустройство полов (используется в качестве подложки под паркет, ламинат), мебельное производство, внутренняя отделка, производство тары, упаковки.

Сырье для производства ФК – в основном лущеная береза, ольха, другие лиственные породы деревьев, иногда комбинация нескольких сортов древесины. Влага действует на внутренние слои материала негативно: деформирует, приводит к скручиванию, расслоению. Максимальная толщина листов может достигать 40 мм. Выделяют несколько сортов, в зависимости от наличия и количества сучков.

ФСФ, наоборот, влагостойка, благодаря чему широко применяется в условиях повышенной влажности. Например, для наружных и внутренних кровельных работ. Материал прочен, невосприимчив к механическим повреждениям, износу.

Сырьем для производства служит древесина хвойных пород, береза. Для придания влаго- и пожаростойкости в процессе производства обрабатывается соответствующими составами. Применяется в авиа- и машиностроении, промышленном производстве и строительных работах.

Внешние отличия ФК от ФСФ

Внешне два материала выглядят практически идентично. Единственное визуальное отличие – цвет среза. Срез ФК светлый за счет безфенольного состава клея, максимально похож на натуральную необработанную древесину. Срез ФСФ намного темнее, с красноватым оттенком, за счет водоотталкивающей прослойки.

Влияние на организм

Безопасность материала в плане влияния на человеческое здоровье – важный критерий выбора материала. В этом плане у ФК и ФСФ листов имеются принципиальные отличия:

Силикатный клей, используемый при производстве ФК, не токсичен. Благодаря чему материал вполне пригоден для внутренних работ и строительства перегородок в сухих помещениях.

В производстве ФСФ используется фенолсодержащий клей, который оказывает негативное влияние на здоровье окружающих.

Принципиальные отличия

Если быть краткими, то:

ФК экологически безопасна, не влагостойка, довольно хрупка, быстро расслаивается и ломается под воздействием влаги. Применима для внутренней отделки, в производстве мебели.

ФСФ негативно влияет на здоровье, устойчива к влаге, обладает повышенной прочностью к давлению излому. Применяется преимущественно в наружных работах: отделка, кровля.

Где применяется и в чем разница фанеры ФК и ФСФ

В строительстве чаще всего используются следующие виды фанеры — ФК и ФСФ. Несмотря на внешнее сходство, это два разных материала с отличными характеристиками. А потому они имеют различные области применения. Выясним, что такое фанера ФСФ, каково ее назначение и чем она отличается от ФК.

Марки ФК и ФСФ: 5 отличий

Фанерный лист состоит из нескольких склеенных между собой слоев шпона. Для склеивания обычно используют следующие виды пропиток:

• Карбамидоформальдегидный клей — для изготовления продукции марки ФК, которая расшифровывается как «фанера карбамидоформальдегидная».
• Смоляной фенолформальдегидный клей — для производства материала марки ФСФ, которая читается так: «фанера смоляная фенолформальдегидная».

Вот в чем разница фанеры ФК и ФСФ — в использовании разных клеевых пропиток. Этим объясняются и другие отличия этих материалов:

• Устойчивость к влаге. Карбамидоформальдегидная — влагостойкая, расслаивается только при набухании древесины. Смоляная фенолформальдегидная — повышенной влагостойкости, не расслаивается даже при набухании шпона.
• Прочность. При одинаковых форматах и толщинах фанерные листы ФСФ, которые можно заказать у нас, демонстрируют более высокую прочность.
• Безопасность. Фанера ФК не содержит фенола, а потому она безвредна. Продукция марки ФСФ выделяет в воздух фенольные соединения, несущие угрозу здоровью.
• Пожаробезопасность. ФК обладает средней устойчивостью к воспламенению, ФСФ — слабой, так как смоляная фенолформальдегидная пропитка легко воспламеняется и поддерживает горение других материалов.

Внимание! Различают еще один вид фанеры ФСФ — это листы марки ФСФ-ТВ (ТВ — «трудновоспламеняемая», или трудногорючая). Для их производства шпон дополнительно пропитывают антипиренами — составами, содержащими вещества, которые замедляют горение.

Область применения

Вот где применяется ФК фанера:

• укладка/выравнивание пола;
• изготовление мебели;
• отделка стен/потолков;
• сооружение перегородок.

Вот где используется ФСФ фанера:

• сооружение опалубки;
• кровельные работы;
• строительство уличных конструкций;
• отделка транспорта (применимо только к листам ФСФ-ТВ).

Фанера ФК и ФСФ — это разные материалы, предназначенные для разных нужд. Поэтому выбрать из них, что лучше, невозможно. Руководствуйтесь при покупке только тем, для каких целей приобретается материал. Для отделки жилых помещений используйте продукцию марки ФК, а для наружных работ отдайте предпочтение листам ФСФ.

Фосфофруктокиназа — обзор | ScienceDirect Topics

Дефицит фосфофруктокиназы

Фосфофруктокиназа (PFK) представляет собой тетрамерный фермент, состоящий из трех отдельных субъединиц, мышцы (M), печени (L) и тромбоцитов (P), которые по-разному экспрессируются в разных тканях. ⁶ Зрелая мышца человека содержит исключительно изоформу M, тогда как эритроциты экспрессируют субъединицы M и L.

При типичной форме дефицита ПФК (гликогеноз VII типа, болезнь Таруи) наблюдается полное отсутствие активности в мышцах и частичный дефицит ферментов в эритроцитах.Клинические проявления неотличимы от дефицита миофосфорилазы и характеризуются непереносимостью интенсивных упражнений, судорогами и миоглобинурией. ^6,71 Однако дефицит PFK-M может также вызывать компенсированную гемолитическую анемию, желтуху и подагрический артрит из-за «миогенной гиперурикемии». ⁷² В отличие от болезни Макардла, пациенты с дефицитом ПФК не испытывают второго дыхания ⁷³ , и их непереносимость упражнений, по-видимому, ухудшается, а не улучшается при высоком потреблении углеводов. ⁷⁴

Атипичные клинические проявления включают гемолитическую анемию без миопатии и фиксированную слабость с поздним началом. ^75–79 Поразительно разные клинические проявления включают миопатию в младенчестве или раннем детстве, с дыхательной недостаточностью и смертью в возрасте до 2 лет. Этот вариант был зарегистрирован у нескольких детей. ⁶ Хотя все они имели тяжелую миопатию с дефицитом PFK, не было зарегистрировано никаких молекулярных дефектов, а гетерогенность клинических и биохимических данных предполагает, что мы можем иметь дело с различной и, возможно, разнообразной молекулярной этиологией.

У пациентов с типичными мышечными заболеваниями лабораторные исследования выявляют повышенные уровни CK, билирубина и мочевой кислоты в сыворотке крови. Ретикулоцитоз — обычное явление, анемия — нет. FIET положительный, но неспецифический. ЭМГ может быть нормальным или показывать миопатический рисунок с раздражающими признаками.

Биопсия мышц показывает накопление субарколеммального и интермиофибриллярного гликогена. Специфическая окраска для фосфофруктокиназы позволяет проводить гистохимическую диагностику, ⁸⁰ , которая может быть подтверждена биохимически в гомогенате мышц.В большинстве случаев тщательное наблюдение за образцом мышечной биопсии выявляет наличие аномального полисахарида, который сильно окрашивается PAS, но не переваривается диастазой (рис. 39.5A). ^76,81 Ультраструктурно этот аномальный гликоген состоит из мелкозернистого и нитевидного материала, подобного амилопектин-подобному полисахариду, который накапливается при дефиците разветвленного фермента, то есть полиглюкозану (рис. 39.5B). Отложение полиглюкозана можно объяснить накоплением в мышцах глюкозо-6-фосфата (G6P), метаболита перед гликолитическим блоком и активатора гликогенсинтазы (GS).Это искажает тонкое соотношение между GS и ферментом ветвления гликогена (GBE) в пользу линейного синтеза, что приводит к образованию полиглюкозана. ^76,81,82

Рисунок 39.5. Биопсия мышц пациента с дефицитом фосфофруктокиназы (PFK) (GSD VII). ( A ) Окрашивание PAS показывает PAS-положительный и устойчивый к диастазе материал (полиглюкозан) под сарколеммой одного волокна. ( B ) Материал имеет мелкозернисто-фибриллярную структуру полиглюкозана.

Ген, кодирующий PFK-M, был отнесен к хромосоме 1 ⁸³ , и сообщалось о полноразмерной кДНК и структуре геномной ДНК. ⁸⁴ Несколько патогенных мутаций были идентифицированы у евреев-ашкенази, которые составляют большинство пациентов, наблюдаемых в Соединенных Штатах, ^85,86 и около 20 мутаций были идентифицированы во всем мире. ⁸⁷

Патогенные мутации в PFKM вызывают фактическое отсутствие активности фермента в скелетных мышцах и частичный дефицит PFK (около 50%) в эритроцитах.Ткани, такие как печень и тромбоциты, экспрессируют преимущественно или исключительно не-M субъединицы PFK и не затрагиваются. Отсутствие клинической кардиомиопатии или энцефалопатии объяснить труднее, потому что PFK-M составляет более 90% сердечных PFK и 50% PFK головного мозга. ⁸⁸ Возможно, стоит обратить внимание на сердечную функцию пациентов с дефицитом ПФК, так как хотя бы у одного пациента помимо типичных миопатических симптомов была «идиопатическая» легкая гипертрофическая кардиомиопатия и пароксизмальная фибрилляция предсердий. ⁸⁷

Специфической терапии нет. Введение глюкозы не только бесполезно, потому что глюкоза входит в гликолитический путь выше метаболического блока, но на самом деле вредно, поскольку снижает концентрацию в крови альтернативных топлив, таких как жирные кислоты и кетоновые тела. ⁷⁴

Двухлетний мальчик с инфантильным вариантом дефицита ПФК получил пользу от кетогенной диеты: ⁸⁹ наблюдалось явное улучшение силы, характеристик ЭМГ и электроэнцефалограммы (ЭЭГ).К сожалению, в 35 месяцев состояние ребенка резко ухудшилось, и он умер от пневмонии. Тем не менее, следует рассмотреть возможность кетогенной диеты у детей с более тяжелой детской формой дефицита PFK.

ПФКМ — АТФ-зависимая 6-фосфофруктокиназа, мышечный тип — Homo sapiens (Человек)

В этом подразделе раздела «Последовательность» описывается последовательность встречающейся в природе альтернативной изоформы (ов) белка. Изменения в аминокислотной последовательности могут быть следствием альтернативного сплайсинга, использования альтернативного промотора, альтернативного инициирования или сдвига рибосомной рамки. Подробнее … Альтернативная последовательность i VSP_046125

1

M → MHKDEFHLKFFMCVIQSRQL VRTPQRTAGEASTSSMLIPK PPPKTDILKSLIPVDTMD 3. Информация, подобранная вручную, основанная на утверждениях в научных статьях, для которых нет экспериментальной поддержки. Подробнее… Ручное утверждение, основанное на мнении в i «Полное секвенирование и характеристика 21 243 полноразмерных кДНК человека». Ота Т., Судзуки Ю., Нисикава Т., Оцуки Т., Сугияма Т., Ирие Р., Вакамацу А., Хаяси К., Сато Х., Нагаи К., Кимура К., Макита Х., Секин М., Обаяси М., Ниси Т., Шибахара Т., Танака Т., Исии С., Ямамото Дж., Сайто К., Кавай Ю., Исоно Ю., Накамура Ю., Нагахари К., Мураками К., Ясуда Т., Иваянаги Т., Вагацума М., Ширатори А. , Судо Х., Хосойри Т., Каку Й., Кодайра Х., Кондо Х., Сугавара М., Такахаши М., Канда K., Yokoi T., Furuya T., Kikkawa E., Omura Y., Abe K., Kamihara K., Katsuta N., Sato K., Tanikawa M., Yamazaki M., Ninomiya K., Ishibashi T. , Ямасита Х., Муракава К., Фудзимори К., Танай Х., Кимата М., Ватанабэ М., Хираока С., Чиба Ю., Исида С., Оно Ю., Такигучи С., Ватанабэ С., Йосида М., Хотута Т., Кусано Дж., Канехори К., Такахаши-Фуджи А., Хара Х., Танасе Т.-О., Номура Ю., Тогия С., Комай Ф., Хара Р., Такеучи К., Арита М., Имосе Н., Мусасино К., Юки Х., Осима А. ., Сасаки Н., Аотсука С., Йошикава Ю., Мацунава Х., Итихара Т., Шиохата Н., Сано С., Мория С., Момияма Х., Сато Н., Таками С., Терашима Ю., Судзуки О., Накагава С., Сено А., Мидзогути Х., Гото Ю., Симидзу Ф., Вакебе Х., Хишигаки Х., Ватанабэ Т., Сугияма А., Такемото М., Каваками Б., Ямадзаки М. ., Ватанабэ К., Кумагаи А., Итакура С., Фукузуми Ю., Фудзимори Ю., Комияма М., Таширо Х., Танигами А., Фудзивара Т., Оно Т., Ямада К., Фуджи Ю., Одзаки К. , Хирао М., Омори Ю., Кавабата А., Хикиджи Т., Кобатаке Н., Инагаки Х., Икема Ю., Окамото С., Окитани Р., Каваками Т., Ногучи С., Ито Т., Сигета К., Сенба Т., Мацумура К., Накадзима Ю., Мидзуно Т., Моринага М. , Сасаки М., Тогаши Т., Ояма М., Хата Х., Ватанабэ М., Комацу Т., Мидзусима-Сугано Дж., Сато Т., Шираи Ю., Такахаси Ю., Накагава К., Окумура К. , Нагасе Т., Номура Н., Кикучи Х., Масухо Ю., Ямасита Р., Накаи К., Яда Т., Накамура Ю., Охара О., Исогай Т., Сугано С. Nat. Genet. 36: 40-45 (2004) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат] Цитируется для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ НУКЛЕОТИДОВ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ MRNA] (ISOFORM 3).

1

Альтернативная последовательность i VSP_004667

282 — 312

Отсутствует в изоформе 2. Ручное утверждение на основе заключения в i Добавить BLAST

31

и ограничения внешнего ключа — SQL Server

• 000Z» data-article-date-source=»ms.date»> 25.07.2017
• Читать 9 минут

В этой статье

Применимо к: SQL Server 2016 (13.x) и более поздних версий База данных SQL Azure Управляемый экземпляр SQL Azure

Первичные ключи и внешние ключи — это два типа ограничений, которые можно использовать для обеспечения целостности данных в таблицах SQL Server. Это важные объекты базы данных.

Этот раздел содержит следующие разделы.

Ограничения первичного ключа

Ограничения внешнего ключа

Связанные задачи

Ограничения первичного ключа

Таблица обычно имеет столбец или комбинацию столбцов, которые содержат значения, однозначно идентифицирующие каждую строку в таблице.Этот столбец или столбцы называется первичным ключом (PK) таблицы и обеспечивает целостность объекта таблицы. Поскольку ограничения первичного ключа гарантируют уникальность данных, они часто определяются в столбце идентификаторов.

Когда вы указываете ограничение первичного ключа для таблицы, компонент Database Engine обеспечивает уникальность данных, автоматически создавая уникальный индекс для столбцов первичного ключа. Этот индекс также обеспечивает быстрый доступ к данным, когда в запросах используется первичный ключ. Если ограничение первичного ключа определено для нескольких столбцов, значения могут дублироваться в одном столбце, но каждая комбинация значений из всех столбцов в определении ограничения первичного ключа должна быть уникальной.

Как показано на следующем рисунке, столбцы ProductID и VendorID в таблице Purchasing.ProductVendor образуют ограничение составного первичного ключа для этой таблицы. Это гарантирует, что каждая строка в таблице ProductVendor будет иметь уникальную комбинацию ProductID и VendorID . Это предотвращает вставку повторяющихся строк.

• Таблица может содержать только одно ограничение первичного ключа.

• Первичный ключ не может превышать 16 столбцов, а общая длина ключа составляет 900 байт.

• Индекс, сгенерированный ограничением первичного ключа, не может привести к тому, что количество индексов в таблице превысит 999 некластеризованных индексов и 1 кластеризованный индекс.

• Если кластеризованный или некластеризованный не указан для ограничения первичного ключа, кластеризованный используется, если в таблице нет кластеризованного индекса.

• Все столбцы, определенные в ограничении первичного ключа, должны быть определены как ненулевые.Если допустимость значений NULL не указана, для всех столбцов, участвующих в ограничении первичного ключа, задано значение NULL для всех столбцов.

• Если первичный ключ определен в столбце определяемого пользователем типа среды CLR, реализация типа должна поддерживать двоичное упорядочение.

Ограничения внешнего ключа

Внешний ключ (FK) — это столбец или комбинация столбцов, которые используются для установления и обеспечения связи между данными в двух таблицах для управления данными, которые могут храниться в таблице внешнего ключа. В ссылке по внешнему ключу связь создается между двумя таблицами, когда столбец или столбцы, содержащие значение первичного ключа для одной таблицы, ссылаются на столбец или столбцы в другой таблице. Этот столбец становится внешним ключом во второй таблице.

Например, таблица Sales.SalesOrderHeader имеет ссылку внешнего ключа на таблицу Sales.SalesPerson , поскольку между заказами на продажу и продавцами существует логическая связь. Столбец SalesPersonID в таблице SalesOrderHeader соответствует столбцу первичного ключа таблицы SalesPerson .Столбец SalesPersonID в таблице SalesOrderHeader является внешним ключом для таблицы SalesPerson . При создании этой связи внешнего ключа значение SalesPersonID не может быть вставлено в таблицу SalesOrderHeader , если оно еще не существует в таблице SalesPerson .

Таблица может ссылаться максимум на 253 другие таблицы и столбцы как внешние ключи (исходящие ссылки). SQL Server 2016 (13.x) увеличивает ограничение на количество других таблиц и столбцов, которые могут ссылаться на столбцы в одной таблице (входящие ссылки), с 253 до 10 000.(Требуется не менее 130 уровня совместимости.) Повышение имеет следующие ограничения:

• Более 253 ссылок на внешние ключи поддерживаются только для операций DELETE DML. Операции UPDATE и MERGE не поддерживаются.

• Таблица со ссылкой внешнего ключа на себя по-прежнему ограничена 253 ссылками на внешний ключ.

• Более 253 ссылок на внешние ключи в настоящее время недоступны для индексов columnstore, оптимизированных для памяти таблиц, растянутой базы данных или секционированных таблиц внешнего ключа.

Индексы ограничений внешнего ключа

В отличие от ограничений первичного ключа, создание ограничения внешнего ключа не приводит к автоматическому созданию соответствующего индекса. Однако создание индекса по внешнему ключу вручную часто бывает полезным по следующим причинам:

• Столбцы внешнего ключа часто используются в критериях соединения, когда данные из связанных таблиц объединяются в запросах путем сопоставления столбца или столбцов в ограничении внешнего ключа одной таблицы со столбцом или столбцами первичного или уникального ключа в другой таблице.Индекс позволяет компоненту Database Engine быстро находить связанные данные в таблице внешнего ключа. Однако создание этого индекса не требуется. Данные из двух связанных таблиц могут быть объединены, даже если между таблицами не определены ограничения первичного или внешнего ключа, но связь внешнего ключа между двумя таблицами указывает на то, что две таблицы были оптимизированы для объединения в запрос, в котором ключи используются как его критерии.

• Изменения ограничений первичного ключа проверяются ограничениями внешнего ключа в связанных таблицах.

Ссылочная целостность

Хотя основной целью ограничения внешнего ключа является управление данными, которые могут храниться в таблице внешнего ключа, оно также контролирует изменения данных в таблице первичного ключа. Например, если строка для продавца удаляется из таблицы Sales.SalesPerson , а идентификатор продавца используется для заказов на продажу в таблице Sales.SalesOrderHeader , реляционная целостность между двумя таблицами нарушается; заказы на продажу удаленного продавца становятся потерянными в таблице SalesOrderHeader без ссылки на данные в таблице SalesPerson .

Ограничение внешнего ключа предотвращает эту ситуацию. Ограничение обеспечивает ссылочную целостность, гарантируя невозможность внесения изменений в данные в таблице первичного ключа, если эти изменения делают недействительной ссылку на данные в таблице внешнего ключа. Если предпринята попытка удалить строку в таблице первичного ключа или изменить значение первичного ключа, действие завершится ошибкой, когда удаленное или измененное значение первичного ключа соответствует значению в ограничении внешнего ключа другой таблицы. Чтобы успешно изменить или удалить строку в ограничении внешнего ключа, вы должны сначала либо удалить данные внешнего ключа в таблице внешнего ключа, либо изменить данные внешнего ключа в таблице внешнего ключа, которая связывает внешний ключ с другими данными первичного ключа.

Каскадная ссылочная целостность

Используя каскадные ограничения ссылочной целостности, вы можете определить действия, которые выполняет компонент Database Engine, когда пользователь пытается удалить или обновить ключ, на который указывают существующие внешние ключи. Можно определить следующие каскадные действия.

НЕТ ДЕЙСТВИЙ
Компонент Database Engine вызывает ошибку, и действие удаления или обновления в строке родительской таблицы откатывается.

CASCADE
Соответствующие строки обновляются или удаляются в ссылающейся таблице, когда эта строка обновляется или удаляется в родительской таблице.CASCADE не может быть указан, если столбец отметки времени является частью внешнего ключа или указанного ключа. ON DELETE CASCADE нельзя указать для таблицы с триггером INSTEAD OF DELETE. ON UPDATE CASCADE нельзя указать для таблиц с триггерами INSTEAD OF UPDATE.

SET NULL
Все значения, составляющие внешний ключ, устанавливаются в NULL, когда соответствующая строка в родительской таблице обновляется или удаляется. Для выполнения этого ограничения столбцы внешнего ключа должны допускать значение NULL.Нельзя указывать для таблиц с триггерами INSTEAD OF UPDATE.

УСТАНОВИТЬ ПО УМОЛЧАНИЮ
Для всех значений, составляющих внешний ключ, устанавливаются значения по умолчанию, если соответствующая строка в родительской таблице обновлена ​​или удалена. Для выполнения этого ограничения все столбцы внешнего ключа должны иметь определения по умолчанию. Если столбец допускает значение NULL и не задано явное значение по умолчанию, NULL становится неявным значением по умолчанию для столбца. Нельзя указывать для таблиц с триггерами INSTEAD OF UPDATE.

CASCADE, SET NULL, SET DEFAULT и NO ACTION можно комбинировать в таблицах, которые имеют ссылочные отношения друг с другом. Если компонент Database Engine обнаруживает NO ACTION, он останавливается и откатывает связанные действия CASCADE, SET NULL и SET DEFAULT. Когда оператор DELETE вызывает комбинацию действий CASCADE, SET NULL, SET DEFAULT и NO ACTION, все действия CASCADE, SET NULL и SET DEFAULT применяются до того, как компонент Database Engine проверит какое-либо действие NO ACTION.

Триггеры и каскадные ссылочные действия

Каскадные ссылочные действия запускают триггеры AFTER UPDATE или AFTER DELETE следующим образом:

• Сначала выполняются все каскадные ссылочные действия, непосредственно вызванные исходным DELETE или UPDATE.

• Если для затронутых таблиц определены какие-либо триггеры AFTER, эти триггеры срабатывают после выполнения всех каскадных действий. Эти триггеры срабатывают в порядке, обратном каскадному действию. Если в одной таблице есть несколько триггеров, они срабатывают в случайном порядке, если только для таблицы нет выделенного первого или последнего триггера. Этот порядок указан с помощью процедуры sp_settriggerorder.

• Если несколько каскадных цепочек происходят из таблицы, которая была прямой целью действия UPDATE или DELETE, порядок, в котором эти цепочки запускают соответствующие триггеры, не указан.Однако одна цепочка всегда запускает все свои триггеры до того, как другая цепочка начинает срабатывать.

• Триггер AFTER для таблицы, которая является прямой целью действия UPDATE или DELETE, срабатывает независимо от того, затронуты ли какие-либо строки. В этом случае нет других таблиц, на которые влияет каскадирование.

• Если какой-либо из предыдущих триггеров выполняет операции UPDATE или DELETE для других таблиц, эти действия могут запускать вторичные каскадные цепочки. Эти вторичные цепочки обрабатываются для каждой операции UPDATE или DELETE за раз после срабатывания всех триггеров на всех первичных цепочках.Этот процесс может рекурсивно повторяться для последующих операций UPDATE или DELETE.

• Выполнение операций CREATE, ALTER, DELETE или другого языка определения данных (DDL) внутри триггеров может вызвать срабатывание триггеров DDL. Впоследствии это может выполнять операции DELETE или UPDATE, которые запускают дополнительные каскадные цепочки и триггеры.

• Если ошибка генерируется внутри какой-либо конкретной цепочки каскадных ссылочных действий, возникает ошибка, в этой цепочке не запускаются триггеры AFTER, а операция DELETE или UPDATE, создавшая цепочку, откатывается.

• Таблица с триггером INSTEAD OF не может также иметь предложение REFERENCES, которое определяет каскадное действие. Однако триггер AFTER для таблицы, на которую нацелено каскадное действие, может выполнить инструкцию INSERT, UPDATE или DELETE для другой таблицы или представления, которые запускают триггер INSTEAD OF, определенный для этого объекта.

Связанные задачи

В следующей таблице перечислены общие задачи, связанные с ограничениями первичного и внешнего ключей.

ПФК Сочи против ФК Химки Прямая трансляция и прогноз

1 месяц назад Матч закончился

---

1 месяц назад Замена (90 ‘)

• Себай, Сенин (Уходит)
• Садыгов Илья Туфанович (В)

---

1 месяц назад Замена (89 ‘)

• Дагерсталь, Филип (Уход)
• Камышев Илья (В)

---

1 месяц назад Замена (86 ‘)

• Юсупов, Артур (Ушел)
• Павлов, Даниил (В)

Хозяева заменят Артура Юсупова на Даниил Павлов.

---

1 месяц назад Замена (83 ‘)

• Глушаков, Денис (Уходит)
• Адеми, Кемаль (In)

---

1 месяц назад Желтая карточка (79 ‘)

• Сабович, Бесард

Бесард Сабович получает желтую карточку.

---

1 месяц назад Замена (79 ‘)

• Попов, Ивелин (Уходит)
• Воробьев, Дмитрий (В)

---

1 месяц назад Замена (79 ‘)

• Прохин, Данила (Уходит)
• Маммана, Эмануэль (В)

---

1 месяц назад Замена (76 ‘)

• Ангбан, Викториан (Ушел)
• Жоаоцзиньо (В)

---

1 месяц назад Цель ! (75 ‘)

• Попов, Ивелин (бомбардир)
• Бурмистров, Никита (Ассистент)

Никита Бурмистров записал голевую передачу.

---

1 месяц назад Цель ! (54 ‘)

• Попов, Ивелин (бомбардир)
• Бурмистров, Никита (Ассистент)

Отличная игра Никиты Бурмистрова по голу.

---

1 месяц назад Замена (46 ‘)

• Барсов, Максим (Уходит)
• Бурмистров, Никита (В)

---

1 месяц назад Замена (46 ‘)

• Кухарчук, Илья (Ушел)
• Сабович, Бесард (In)

---

1 месяц назад Замена (46 ‘)

• Трошечкин, Александр (Уходит)
• Соколов, Артем (В)

---

1 месяц назад Цель ! (17 ‘)

• Барсов, Максим (бомбардир)
• Попов, Ивелин (Ассистент)

Ивелин Попов инструментал с голевой передачей.

---

1 месяц назад Матч начался

---

ПФК | Агентство Недвижимости | Земельное агентство | Планирование | Опросы

«Превосходный сервис от команды PFK. Действительно полезный, профессиональный и гибкий подход к продаже нашей собственности. Не могу придраться к их поддержке и способности найти нужного покупателя. Рад снова использовать их в будущем.
«

Мистер Канлифф, Кесвик

«Лучшие агенты по недвижимости, которых мы когда-либо использовали.Дружелюбное, профессиональное и очень услужливое обслуживание. Мы будем использовать для продажи наших следующих 2 объектов недвижимости. Пять стартовых сервисов по кругу ».

Мистер Морган, Агентство недвижимости

«Компания PFK Media создала два коротких видеоролика, которые мы использовали для цифровых маркетинговых кампаний в рамках недавнего повторного запуска наших отелей с PFK. Внимание к деталям обеспечивает высокопрофессиональный продукт, и мы надеемся на сотрудничество с ним в будущем.«

Willan Homes & Developments, Медиа-услуги

«Reiver Homes использовала услуги PFK Media для создания видеокампаний для двух девелоперских компаний в Шотландии и Камбрии. Аллен был чрезвычайно надежен и поддерживал связь перед съемками и на протяжении всего процесса монтажа».

Reiver Homes, Медиа-услуги

«PFK получил сложное разрешение на застройку для изменения использования собственности, которая недавно попала под новый режим планирования в связи с расширением национального парка Йоркшир-Дейлз — хороший результат.«

Мистер Кэпстик, планирование

«Работать с Алленом одно удовольствие, и я очень рекомендую. Он невероятно надежен, поддерживает отличное общение до, во время и после каждого проекта, а также снимает высококачественные кадры с дронов».

C Прескотт-Девелинг, Медиа-услуги

«Большое спасибо PFK, и особенно Лизель, чей профессионализм и знание местных условий сделали продажу нашего дома отличным опытом.Мы чувствовали, что имеем дело с другом, который заботится о наших интересах ».

Мистер и миссис Фуллер, агентство недвижимости

«Обслуживание PFK было очень профессиональным и обнадеживающим, с четким общением на протяжении всего моего двухлетнего процесса… на вопросы были даны быстрые ответы, и команде было приятно иметь дело. Я без колебаний порекомендую ваши услуги.«

Миссис Паунолл, отдел планирования

«Большое спасибо за вашу помощь и поддержку. Я бы не справился без вас, такой преданной команды и отличного общения. Вы превзошли все ожидания».

Миссис Ли, агентство недвижимости

«Рад рекомендовать ПФК.Их профессионализм в подготовке нашей оценки и подробных сведений быстро привлек запросы, которые команда обработала квалифицированно. В результате процесс продажи оказался гораздо менее сложным, чем мы предполагали ».

Дж. Кэмерон, Земельное агентство

новых метаболических мишеней в терапии гематологических злокачественных новообразований

В течение последнего десятилетия разработка противоопухолевой терапии была сосредоточена на нацеливании на метаболизм, связанный с опухолями.Раковые клетки демонстрируют различные изменения в своем метаболизме, что позволяет им удовлетворять высокие биоэнергетические и биосинтетические потребности в быстром делении клеток. Одно из важнейших изменений называется «эффектом Варбурга», который включает метаболический сдвиг от окислительного фосфорилирования к менее эффективному гликолизу, независимо от присутствия кислорода. Хотя существует множество примеров солидных опухолей с измененным метаболизмом с высокими показателями поглощения глюкозы и гликолиза, только недавно было сообщено, что это явление встречается при гематологических злокачественных новообразованиях.В этом обзоре представлены доказательства того, что нацеливание на гликолитический путь на разных уровнях при гематологических злокачественных новообразованиях может подавлять пролиферацию раковых клеток за счет восстановления нормальных метаболических условий. Однако для достижения регресса рака используются высокие концентрации гликолитических ингибиторов из-за ограниченной растворимости и биораспределения, что может привести к токсичности. Помимо использования этих ингибиторов в качестве монотерапии, комбинаторные подходы с использованием стандартных химиотерапевтических агентов могут показать повышенную эффективность при уничтожении злокачественных клеток.Идентификация метаболических ферментов, критических для пролиферации и выживания гематологических раковых клеток, представляется новым интересным подходом к таргетной терапии гематологических злокачественных новообразований.

1. Введение

В этой статье будут рассмотрены различные важные аспекты метаболических процессов, имеющих отношение к развитию и поддержанию рака, с акцентом на гематологические злокачественные новообразования (HMs). Кроме того, мы выделим низкомолекулярные соединения, которые ингибируют гликолиз и другие взаимосвязанные процессы, и их потенциальные применения в лечении тяжелых металлов.

За последние десятилетия многие исследовательские группы обычно сообщали, что одна из основных характеристик опухолевых клеток заключается в том, что они несут множество мутаций, которые в совокупности перенаправляют сеть внутриклеточных сигнальных путей. Более того, современный высокопроизводительный анализ последовательностей ДНК показал, что эти мутации более многочисленны и разнородны, чем считалось ранее [1, 2]. В некоторых случаях мутации различаются между гистопатологически идентичными опухолями и изменяются в процессе прогрессирования опухоли [3].Как следствие, развитие и прогрессирование опухоли все чаще рассматриваются как чрезвычайно сложные процессы. Таким образом, в большинстве случаев будет сложно или невозможно специфически уничтожить раковые клетки, воздействуя на один онкоген. Следовательно, дальнейшее понимание биологических различий между раковыми и нормальными клетками необходимо для разработки и разработки новых селективных и эффективных противоопухолевых методов лечения. Однако становится все более очевидным, что многие сигнальные пути, активируемые онкогенами, сходятся в направлении адаптации метаболизма опухолевых клеток для обеспечения энергией и необходимыми биомолекулами, необходимыми для быстрого деления клеток [4-6].В последние годы большое количество различных солидных опухолей было связано с повышенным метаболизмом (например, рак простаты [7], рак груди [8], глиобластома [9], карцинома яичников [10], рак поджелудочной железы [11], и многие другие). Сейчас принято считать, что метаболизм раковых клеток имеет чрезвычайно уникальные характеристики по сравнению с метаболизмом здоровых непролиферирующих клеток [4]. Действительно, раковые клетки демонстрируют метаболическую адаптацию, называемую аэробным гликолизом или «эффектом Варбурга», которая заключается в метаболическом сдвиге для увеличения гликолитического пути как основного источника АТФ вместо окислительного фосфорилирования (OXPHOS), независимо от присутствия кислорода [ 12, 13].Несколько исследований продемонстрировали, что этот сдвиг в значительной степени способствует удовлетворению высоких биоэнергетических и биосинтетических требований для быстрого деления клеток при раке [12–14]. Кроме того, высокая скорость гликолиза в опухолевых клетках связана с устойчивостью к химио- и лучевой терапии [15]. Эти наблюдения предполагают, что блокирование гликолиза может негативно повлиять на прогрессирование опухоли и может повысить эффективность химио- и лучевой терапии. Действительно, было проведено множество исследований in vivo (т.е.например, остеосаркома человека, карцинома легких [15] и рак яичников [16]) и in vitro (т.е. клетки глиомы, плоскоклеточной карциномы и карциномы толстой кишки [17]) показали, что нацеливание на гликолитический путь специфическими соединениями повышает чувствительность клеток к широко используемым противоопухолевым препаратам.

2. Гликолиз

Гликолиз — это 10-ступенчатый путь, который превращает молекулу глюкозы в 2 пирувата с чистым образованием 2 молекул АТФ и параллельно обеспечивает промежуточные соединения для анаболических путей (рис. 1).Каждая стадия гликолитической реакции катализируется определенным ферментом или ферментным комплексом. Некоторые из этих ферментов включают варианты изоформ, которые экспрессируются зависимым от контекста и ткани образом [18], что приводит к повышенной сложности гликолитического пути. Сообщалось, что при различных формах рака нарушается регуляция различных гликолитических белков, что способствует аэробному гликолизу (таблица 1).

Рак экспрессия 906 35 [129–133] Белок Изменение Тип опухоли Ссылка GLUT1 mRNA6 1935 сверхэкспрессия груди HKII Сверхэкспрессия мРНК Мультиформная глиобластома [126] PGI Сверхэкспрессия мРНК Колоректальный рак Сверхэкспрессия Рак прямой кишки [31] [31] [34–36] GAPDH Сверхэкспрессия мРНК Рак легких, почек, молочной железы, колоректального, гепатоцеллюлярного и поджелудочного рака [127–129] PKM2 мРНК рак почек, груди, толстой кишки и желудочно-кишечного тракта LDH-A Амплификация гена Рак легких, поджелудочной железы и колоректального рака [92]

GLUT1: транспорт глюкозы 1; HK: гексокиназа; PGI: фосфоглюкозоизомераза; ПФК: фосфофруктокиназа; GAPDH: глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа; PKM2: пируваткиназа M2; ЛДГ-А: лактатдегидрогеназа А. Информация была получена с http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed.

3. Транспортеры глюкозы

Поступление глюкозы в клетки достигается за счет облегченной диффузии через семейство переносчиков глюкозы (GLUT) [18]. Это семейство состоит из 14 белков, сгруппированных в 3 подкласса, которые отличаются друг от друга своим сродством к глюкозе [19]. GLUT1 способствует увеличению скорости транспорта глюкозы в клетки, и о нарушении регуляции его экспрессии сообщалось во многих опухолях, но не в нормальных тканях [20].

4. Гексокиназа

Гексокиназа (HK) состоит из четырех изоформ (от I до IV), которые различаются своими кинетическими свойствами, а также тканеспецифической экспрессией и субклеточной локализацией [21, 22]. Изоформа гексокиназы II (HKII), как известно, играет решающую роль в инициировании и поддержании высоких скоростей катаболизма глюкозы в быстрорастущих опухолях [23, 24]. Некоторые опухолевые клетки обнаруживают повышенное количество копий гена в HKII [25]. Промотор гена HKII является мишенью для множественных сигналов, активируемых глюкозой, гипоксическими условиями и инсулином, каждый из которых увеличивает скорость его транскрипции [26, 27].Из-за связывания HKII с внешней мембраной митохондрий, где расположен потенциал-зависимый анионный канал (VDAC) [22], этот фермент использует АТФ, продуцируемый окислительным фосфорилированием, в качестве субстрата для производства G-6-P. Это взаимодействие HKII с митохондриальной мембраной оказывается более тесным в опухолевых клетках, чем в нормальных клетках [28]. Взаимодействие HKII-VDAC считается связующим звеном между измененным клеточным метаболизмом и ингибированием апоптоза, поскольку оно придает устойчивость к проницаемости митохондриальной мембраны, что является критическим этапом апоптоза [29].

5. Глюкозо-6-фосфат-изомераза

Третий гликолитический фермент в метаболическом пути — глюкозо-6-фосфат-изомераза (PGI). Этот фермент используется в качестве прогностического маркера, поскольку экспрессия PGI связана с прогрессированием рака и агрессивным злокачественным поведением [30, 31]. Однако участие PGI в метаболизме рака еще полностью не выяснено.

6. Фосфофруктокиназа

Следующим ферментом в этом пути является фосфофруктокиназа (PFK), которая является важной контрольной точкой в ​​гликолитическом пути и, как принято считать, поддерживает гликолитический поток [32, 33].Активность PFK заметно увеличивается в линиях раковых клеток и первичных опухолевых тканях in situ [34–36]. Повышенная активность PFK-1 также характерна для раковых клеток и индуцируется в ответ на онкогены или после активации индуцируемого гипоксией фактора 1 α (HIF1 α ) [21, 37]. Недавно сообщалось, что ингибирование PFK посттрансляционной модификацией, такой как гликозилирование, дает преимущество в селективном росте раковых клеток [38].

7.Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

Другой фермент, связанный с повышенной гликолитической активностью, — это глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) [39, 40]. GAPDH влияет на множество клеточных процессов, включая эндоцитоз, экзоцитоз, слияние мембран, везикулярный секретор, апоптоз нейронов, репликацию и репарацию ДНК, ядерный транспорт тРНК и организацию цитоскелета [21, 41], благодаря своей известной неферментативной активности, такой как связывание с NAD ^{. +} или НАДН, а также к ДНК и РНК [35, 42–44].

8. Пируваткиназа

Конечная реакция гликолиза катализируется пируваткиназой (PK), которая, как сообщается, играет решающую роль в перепрограммировании метаболизма гликолита. Существует четыре изофермента PK млекопитающих (M1, M2, изоформа печени (L) и изоформа эритроцитов (R)). PKM2 является эмбриональной и ассоциированной с раком изоформой и выполняет свою функцию, образуя тетрамер или менее активный димер [45]. Менее активная димерная форма PKM2 в основном обнаруживается при раке. Чаще всего он проявляется при раке толстой кишки [46], раке почек [47], раке груди [48], раке легких и опухолях желудочно-кишечного тракта [49].PKM2, как известно, непосредственно способствует эффекту Варбурга [46], поскольку он способствует накоплению промежуточных продуктов гликолиза для следующих анаболических процессов: синтеза нуклеиновой кислоты, аминокислот и фосфолипидов [50]. PKM2 придает преимущество роста опухолевым клеткам, особенно в условиях гипоксии. Замена PKM2 нормальной взрослой изоформой PKM1 в опухолевых клетках снижает их гликолитическую скорость и снижает их способность расти в виде ксенотрансплантатов [46].

9. Лактатдегидрогеназа

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) представляет собой тетрамерный фермент, который существует в пяти изоформах, в основном расположенных в цитозоле [51].Пять изоформ состоят из различных возможных комбинаций двух типов субъединиц: LDH-A и LDH-B [52]. Давно признано, что многие раковые опухоли человека имеют более высокие уровни экспрессии ЛДГ, чем нормальные ткани [53, 54], и, следовательно, ЛДГ уже признана одной из наиболее многообещающих мишеней рака. Фактически, ингибирование LDH-A оказало антипролиферативное действие на опухоль груди [55, 56]. Кроме того, исследования первичной лимфомы груди предполагают, что агрессивное поведение и повышенный уровень ЛДГ являются прогностическими факторами плохого прогноза и выживаемости [57].

10. Цикл трикарбоновых кислот

Митохондриальная пируватдегидрогеназа (PDH) превращает пируват в ацетил-КоА, который далее направляется в цикл трикарбоновых кислот (цикл TCA) и окислительное фосфорилирование. ПДГ негативно регулируется киназой пируватдегидрогеназы (ПДК) посредством фосфорилирования [58]. Это фосфорилирование ПДГ снижает вход пирувата в митохондриальный окислительный метаболизм [59]. Известно, что PDK является ключевым регулятором эффекта Варбурга [60] и рассматривается как новая терапевтическая мишень в онкологии [61].

Широкий спектр типов рака, по-видимому, имеет усиленный гликолитический путь и позволяет использовать промежуточные продукты для анаболических реакций [62, 63]. Факторы транскрипции, такие как HIF1 α [64, 65], c-Myc [66–68] и p53 [69], прямо или косвенно вносят вклад в эту метаболическую адаптацию опухолей. Эти взаимодействия кажутся фундаментальными для управления аберрантным метаболическим поведением опухолевых клеток, способствуя эффекту Варбурга [67–70]. Тем не менее, генные сети, участвующие в метаболизме рака, еще полностью не выяснены.Таким образом, было бы полезно обратить вспять эффект Варбурга, чтобы нормализовать метаболизм опухоли, что может быть потенциальной терапевтической стратегией для лечения рака.

Поскольку одной из особенностей ТМ является их способность к быстрому размножению и высокой метаболической потребности, лучшее понимание регуляции множественных метаболических путей в ТМ может открыть новые терапевтические возможности, в частности, за счет восстановления измененного энергетического метаболизма рака.

11. Доклиническая эффективность ингибиторов гликолиза

Ингибиторы гликолиза обычно разрабатывались для нацеливания на ферменты, которые не регулируются в раковых клетках по сравнению с их нормальными аналогами.К настоящему времени разработано множество ингибиторов гликолита, и их эффективность была продемонстрирована в исследованиях in vitro и in vivo [71]. Более того, некоторые из этих ингибиторов уже прошли клинические испытания (таблица 2). Хотя точные молекулярные механизмы, лежащие в основе зависимости опухолей от гликолиза, до конца не изучены [71], ингибирование гликолиза открывает возможные терапевтические возможности для лечения рака. Действительно, было идентифицировано несколько небольших молекул, и было показано, что они проявляют многообещающую противораковую активность как in vitro , так и in vivo , в качестве отдельных агентов или в комбинации с другими терапевтическими способами.

Лекарство Мишень Группа или клеточные линии Фаза Ссылка 2-DG , головка HK рак шеи, поджелудочной железы и желудка Завершено в 2009 г. [134] 2-DG HK Пациенты с запущенным раком и гормонорезистентным раком простаты Завершено в 2011 г. [135] 3-BrPA HK Линии клеток острого лимфобластного лейкоза в детском возрасте Доклинические [110, 121] FX11 LDH-A Рост опухоли Доклинический 900

2-дезоксиглюкоза (2-DG), 3-бромпируват (3-BrPA), (FX11 [3-дигид рокси-6-метил-7- (фенилметил) -4-пропилнафталин-1-карбоксильная кислота] (FX11) и дихлорацетат (DCA).Информация была получена с http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed. 72, 73]. 2-DG представляет собой аналог глюкозы, который фосфорилируется ферментом HK до 2-дезоксиглюкозо-6-фосфата (2-DG-6-P). 2-ДГ-6-П не может далее метаболизироваться и накапливается в цитоплазме, что приводит к проксимальной блокаде гликолиза [73].В нескольких сообщениях показано, что цитотоксические эффекты 2-DG неоднородны [74, 75]. Было обнаружено, что цитотоксические эффекты 2-DG выше в раковых клетках в условиях гипоксии или в клетках с митохондриальными дефектами [76–79]. В недавних исследованиях сообщалось о терапевтической эффективности 2-DG в сочетании с химиотерапевтическими препаратами или ионизирующим излучением, и действительно, в обоих случаях ингибитор усиливал повреждение раковых клеток, одновременно уменьшая повреждение нормальных клеток [78, 79] (т.е. 2-ДГ в сочетании с цисплатином и доксорубицином оказывал значительный цитотоксический эффект на быстро делящиеся клетки, тогда как на медленно растущие клетки никакого эффекта не наблюдалось [80].) 2-DG может также усиливать повреждение ДНК, вызванное облучением в раковых клетках [76]. 13. Множественные ингибиторы гликолиза: 3-бромпируват (3-BrPA) Метаболический блокатор 3-бромпируват (3-BrPA) (рис. 2) представляет собой галогенированный аналог пировиноградной кислоты с сильными алкилирующими свойствами и получил значительные преимущества. внимание в связи с его замечательной противоопухолевой активностью [71, 81]. Тестирование in vitro продемонстрировало, что 3-BrPA ингибирует гликолиз и блокирует производство АТФ, вызывая, таким образом, апоптоз в зависимости от дозы [71].Подобно 2-DG, 3-BrPA проявляет сильную цитотоксическую активность против раковых клеток с митохондриальными респираторными дефектами и против клеток в гипоксической среде [82]. Считается, что 3-BrPA ингибирует HKII посредством ковалентной модификации одного или нескольких остатков цистеина, что приводит к ослаблению скорости гликолиза [83]. Дальнейшие исследования с использованием радиоактивно меченного 3-BrPA идентифицировали гликолитический фермент GAPDH как первичную внутриклеточную мишень этого агента [84]. Связывание 3-BrPA с GAPDH вызывало ингибирование его ферментативной активности и, как следствие, гликолитической продукции АТФ, что приводило к гибели клеток в результате апоптоза [85].Противоопухолевые эффекты 3-BrPA являются результатом снижения некоторых промежуточных продуктов гликолиза, что нарушает восполнение анаболических реакций, ответвляющихся от гликолитического пути [86]. Действительно, 3-BrPA-опосредованное ингибирование HKII может привести к разумному снижению синтеза рибозо-5-фосфата [71]. Точно так же ингибирование GAPDH может снижать уровни его нижележащего метаболита, 3-фосфоглицерата, тем самым уменьшая продукцию липидов и аминокислот, происходящих из него [87].3-BrPA также проявил эффект на экстрагликолитический фермент сукцинатдегидрогеназу (SDH) [88], который способствовал блокировке продукции АТФ и нарушению дыхательной функции митохондрий. 3-BrPA эффективен при концентрации 100 нМ, что означает, что он более эффективен, чем 2-DG, который эффективен в диапазоне концентраций мМ [88]. Хотя многие доклинические исследования подтвердили его противоопухолевые свойства, молекулярные мишени и механизмы, лежащие в основе цитотоксичности, вызванной 3-BrPA, полностью не определены, поэтому его применение на людях еще не проверено клиническими испытаниями. 14. Ингибирование PKM2 До сих пор ингибирование PKM2 достигалось с помощью РНК-интерференции (РНКи), которая индуцировала апоптоз и регрессию опухоли, частично за счет реверсии метаболического сдвига [89]. 15. Ингибиторы LDHA: (FX11 [3-дигидрокси-6-метил-7- (фенилметил) -4-пропилнафталин-1-карбоновая кислота]) FX11 [3-дигидрокси-6-метил-7- (фенилметил ) -4-пропилнафталин-1-карбоксильная кислота] (FX11) (рис. 2) представляет собой низкомолекулярный ингибитор, селективный в отношении LDHA [90].FX11 был идентифицирован путем скрининга библиотеки соединений, полученных из природного продукта госсипола, известного противомалярийного ингибитора ЛДГ [91]. Было показано, что FX11 вызывает окислительный стресс и гибель клеток in vitro , а также ингибирует прогрессирование лимфомы человека и ксенотрансплантатов поджелудочной железы in vivo [92]. Дополнительные исследования описали снижение уровней АТФ и индукцию значительного окислительного стресса и гибели клеток при лечении FX11 [92]. Несколько исследований документально подтвердили, что ингибирование LDHA может снизить клеточную трансформацию и заметно замедлить образование опухоли, указывая на то, что LDHA требуется для прогрессирования опухоли [93, 94].Также было показано, что FX11 в сочетании с FK866, другим метаболическим ингибитором, который ингибирует синтез NAD + посредством прямого ингибирования никотинамидфосфорибозилтрансферазы, может вызывать регресс лимфомы [95]. Тем не менее, об оценке FX11 в клинических исследованиях еще не сообщалось. 16. Ингибиторы PDK1: Дихлорацетат Дихлорацетат (DCA) является миметической формой пирувата, и среди нескольких ингибиторов гликолита он, как известно, значительно снижает выработку лактата в клеточных линиях миеломного рака [96].Это связано со способностью DCA ингибировать PDK1 [97–99], что приводит к нарушению фосфорилирования PDH. Обработка DCA восстанавливала активность PDH, которая может поставлять ацетил-CoA в цикл TCA и окислительный метаболизм [98]. Противоопухолевая активность DCA была документально подтверждена против различных типов раковых клеток, происходящих из рака легких [97], груди [100], простаты [101], эндометрия [102] и колоректального рака [103]. 17. Гематологические злокачественные новообразования ТМ представляют собой совокупность гетерогенных заболеваний, происходящих из клеток костного мозга и лимфатической системы.Общая распространенность гематологического рака увеличивается, составляя пятую по распространенности группу рака [104]. ТМ включают лимфомы, лейкоз, миелопролиферативные новообразования, дискразии плазматических клеток, гистиоцитарные опухоли и новообразования дендритных клеток. Заболеваемость ТМ увеличивается с возрастом (средний возраст на момент постановки диагноза: 63 года). Таким образом, не существует золотого стандарта для классификации болезней кроветворения; на протяжении многих лет применялось несколько методов. Среди них наиболее часто используемые системы включают пересмотренную европейско-американскую классификацию 1994 г. (REAL), франко-американо-британскую систему (FAB) и классификацию Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) в 2001 г. (обновленную в 2008 г.) [105].Неспособность самой ранней классификации, основанной на клеточной морфологии и гистологической архитектуре, различать подтипы ТМ привела к включению двух дополнительных критериев в классификацию REAL ВОЗ в 2001 году: иммунофенотип и генетический фон. В настоящее время широко используется и принята классификация ВОЗ, обновленная в 2008 г. [106]. Действительно, эта система классифицирует злокачественные новообразования гемопоэтических и лимфоидных тканей на основе морфологических, иммунофенотипических, генетических и клинических признаков с целью повышения диагностической точности.Кроме того, эта классификация создала пограничные категории для случаев, которые не вписываются в определенную подгруппу. По возможности, различные типы рака сгруппированы по происхождению в миелоидные новообразования, лимфоидные новообразования и гистоцитарные / дендритные новообразования [105]. Существуют также новообразования, которые демонстрируют признаки как миелоидной, так и лимфоидной дифференцировки, вероятно, из-за того, что они происходят из мультипотентных клеток-предшественников, и затем они классифицируются как новообразования миелоидного и лимфоидного происхождения. 18. Миелоидные новообразования Миелоидные новообразования обычно происходят из предшественников, коммитированных в костном мозге, которые ограничены образованием эритроцитов, гранулоцитов (нейтрофилов, базофилов и эозинофилов), моноцитов или мегакариоцитов. Миелоидные новообразования обычно представляют собой заболевания взрослых, проявляющиеся симптомами в среднем в возрасте 64 лет. Их можно разделить на три широких клинических класса: острые миелоидные лейкозы (AML), миелопролиферативные новообразования (MPN) и миелодиспластические синдромы (MDS).Первый, AML, имеет очень агрессивный исход и требует немедленной терапии, тогда как клиническое поведение MPN и MDS может быть довольно вялым. ОМЛ характеризуется наличием более 20% миелоидных бластов в костном мозге или периферической крови и подразделяется на пять групп: (а) ОМЛ с рецидивирующими генетическими аномалиями, (б) ОМЛ с изменениями, связанными с миелодисплазией, (в) терапия -связанные миелоидные новообразования, (d) ОМЛ, если иное не указано, и (e) миелоидная саркома и миелоидная пролиферация, связанные с синдромом Дауна. Вторые миелоидные новообразования, MPN, представляют собой группу заболеваний, связанных с пролиферацией одной конкретной миелоидной линии (т. Е. Гранулоцитов, эритроидных, мегакариоцитарных или тучных клеток). Это заболевание часто связано с мутациями, вызывающими аномальное повышение активности тирозинкиназы и независимую от фактора роста пролиферацию предшественников костного мозга. MPN можно разделить на (a) хронический миелоидный лейкоз (CML), (b) хронический нейтрофильный лейкоз (CNL), (c) истинную полицитемию (PCV), (d) эссенциальную тромбоцитемию (ET), (e) первичный миелофиброз ( PMF), (f) хронический эозинофильный лейкоз (CEL), (g) мастоцитоз и (h) неклассифицируемые миеолопролиферативные новообразования (называемые атипичными MPN).Третий подтип миелоидных новообразований, МДС, относится к расстройствам, проявляющим дисплазию и с переменным риском трансформации в острый лейкоз. Кроме того, кроветворение неэффективно и приводит к цитопении. Подобно AML и MPN, MDS состоит из нескольких подтипов: (a) рефрактерная цитопения с однолинейной дисплазией, (b) рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами, (c) рефрактерная цитопения с многолинейной дисплазией, (d) рефрактерная анемия с избытком бластов, (e) ) неклассифицируемый МДС и (е) детский МДС. 19. Лимфоидные новообразования Лимфоидные новообразования — это новообразования, происходящие из клеток, которые развиваются в Т-лимфоциты (цитотоксические Т-лимфоциты, хелперные Т-лимфоциты или регуляторные Т-лимфоциты) или В-лимфоциты. Лимфоидные новообразования делятся на 2 группы: новообразования, происходящие из лимфоидных предшественников (т.е. острый лимфобластный лейкоз / лимфома, ОЛЛ), и новообразования зрелых лимфоцитов и плазматических клеток. Первая группа состоит из двух основных категорий: предшественник В-лимфобластного лейкоза / лимфомы и предшественник Т-лимфобластного лейкоза / лимфомы.Что касается новообразований зрелых лимфоцитов, ВОЗ сгруппировала заболевания на основе B- или T-клеточного происхождения. Классификация зрелых B-клеточных новообразований основана на сравнении аберрантного и нормального развития B-клеток и делится на (а) хронический лимфолейкоз / малую лимфоцитарную лимфому (CLL / SLL), (b) лимфоплазмоцитарную лимфому (LPL), (c) ) лимфома из клеток мантии (MCL), (d) пролимфоцитный лейкоз B-клеток (B-PLL), (e) фолликулярная лимфома (FL), (f) диффузная крупноклеточная лимфома (DLBCL), (g) лимфома / лейкемия Беркитта ( BL), (h) В-клеточная лимфома маргинальной зоны (MZL), (i) волосатоклеточный лейкоз (HCL) и (l) плазматическая миелома / плазмоцитома.Болезнь Ходжкина или лимфома Ходжкина (HL) отделяется от других В-клеточных лимфом на основании своего уникального клеточного состава, содержащего меньшую часть неопластических клеток на воспалительном фоне. HL можно разделить на две основные подгруппы: HL с преобладанием узловых лимфоцитов и классическая HL. Новообразования зрелых Т-клеток и естественных киллеров (NK) представляют собой лимфоидные новообразования зрелых Т-клеток или NK-клеток, включая (а) периферическую Т-клеточную лимфому (PTCL), (b) анапластическую крупноклеточную лимфому (ALCL), (c) первичные кожные периферические Т-клеточные лимфомы, Т-клеточный лейкоз-лимфома взрослых (ATL), (d) Т-лимфоцитарный лейкоз (LGL), (e) Т-клеточный пролимфоцитарный лейкоз (T-PLL) и (f) NK-клеточный крупнозернистый лимфолейкоз (LGL). Последняя группа ТМ, согласно классификации ВОЗ 2008 г., включает гистиоцитарные / дендритные новообразования, происходящие из дополнительных антигенпредставляющих клеток-предшественников (APC или дентритные клетки) или макрофагов соединительной ткани (гистиоцитов). Гистиоцитарные / дендритные новообразования делятся на 3 группы: (а) гистиоцитарная саркома, (б) опухоли, происходящие из клеток Лангерганса, и (в) фолликулярная дендритная саркома. 20. Факторы риска и стандартный протокол для ТМ Существует множество факторов риска, играющих роль в развитии ТМ.Возраст является наиболее значительным фактором риска, поскольку эти виды рака чаще всего возникают у пациентов в возрасте 60 лет и старше. Кроме того, воздействие бензола, ионизирующее излучение или определенные типы вирусных инфекций (например, HTLV1 или ВИЧ) были связаны с развитием лейкемии. Тип рака, стадия, возраст, пол, раса и наличие хромосомных аномалий являются важными факторами при лечении ТМ. На основании этих факторов лечение может включать химиотерапию, лучевую терапию, таргетную терапию и трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток.Частые хромосомные аномалии в HM включают делеции, амплификации и транслокации генов. Основной и наиболее важной хромосомной аномалией при ХМЛ является наличие филадельфийской хромосомы (Ph + ), возникающей в результате транслокации t (9; 22), приводящей к образованию BCR / ABL (область кластера контрольных точек / гомолог вирусного онкогена мышиного лейкоза ABelson). слияние генов. Более 85% пациентов с диагнозом ХМЛ имеют хромосому Ph + . Наличие хромосомы Ph + при отсутствии дополнительных хромосомных изменений связано с хорошим прогнозом при ХМЛ.Большое количество структурных и числовых хромосомных изменений описано в ALL [107]. Однако некоторые из этих изменений происходят чаще, чем другие. Ген смешанного лейкоза человека (MLL) на хромосоме 4, транслокация t (12; 21), приводящая к слиянию генов TEL / AML (Translocation Ets-Leukemia / Acute-Myeloid-Leukemia), гипердиплоидии, вместе с t (9 ; 22) транслокации, которые вызывают слияние BCR / ABL, являются наиболее частыми кариотипическими аномалиями при ОЛЛ. Ген слияния TEL / AML, по-видимому, связан с хорошим прогнозом при ОЛЛ, в то время как наличие BCR / ABL имеет неблагоприятный прогноз [108]. 21. Нацеленность на гликолитический путь в ТМ Хотя существует множество примеров быстро пролиферирующих солидных опухолевых клеток, которые имеют фундаментальные изменения в их метаболизме и демонстрируют повышенную зависимость от гликолитического пути для генерации АТФ, об этом сообщалось только недавно. что этот феномен также встречается у HM. Метаболические различия между нормальными и раковыми клетками обеспечивают основу для разработки терапевтического подхода к избирательному уничтожению раковых клеток.До сих пор исследования измененного метаболизма ТМ были в основном сосредоточены на ОМЛ и ОЛЛ. Имеющиеся данные подтверждают гипотезу о том, что эти подтипы лейкемии демонстрируют зависимость от гликолиза в аэробных условиях, что дает потенциальную возможность использования ингибиторов гликолиза при остром лейкозе. Было опубликовано, что лейкозные клетки, как и опухолевые клетки, изменяют свой метаболизм с окислительного фосфорилирования на менее эффективный гликолиз. Доказательством этого феномена является наблюдение, что некоторые гены, участвующие в метаболизме глюкозы, по-разному экспрессируются при детской лейкемии.Профили экспрессии показали, что экспрессия HIF-1 , α , GLUT1, GLUT3, карбоангидразы 4 (CA4) и GAPDH была значительно выше в лейкозных клетках, чем в нормальной периферической крови [109]. Вдобавок лейкозные клетки с увеличением скорости гликолиза, по-видимому, проявляют устойчивость к глюкокортикоидам и ингибирование гликолиза, что делает устойчивые в других отношениях лейкозные клетки чувствительными к лечению глюкокортикоидами. Ингибитор гликолиза первого поколения, 2-DG, может изменить устойчивость клеток лейкемии к глюкокортикоидам [110].Лечение 2-DG усиливало химиотерапевтические эффекты глюкокортикоидов (т.е. дексаметазона, преднизона и его производных), в частности, против лейкозных клеток с митохондриальными дефектами. Этот феномен был продемонстрирован не только на клеточных линиях, но также наблюдался на первичных лейкозных клетках пациентов с детской лейкемией. Однако клиническая осуществимость этого соединения ограничена [111] из-за высоких (мМ) концентраций препарата, необходимых для эффективности. Кроме того, недавние исследования показали, что 2-DG не только ингибирует гликолиз и потребление глюкозы для производства АТФ или жирных кислот, но также может метаболизироваться через пентозофосфатный путь (PPP).Более того, 2-DG изменяет гликозилирование белка, в частности, ингибируя N-гликозилирование. Было показано, что посредством ингибирования N-гликозилирования 2-DG убивает клетки при нормоксии и вызывает последующий клеточный стресс. По этой причине другие ингибиторы фермента HKII были протестированы при лейкемии. 3-BrPA, по-видимому, обладает большей эффективностью, но все же требует высокой дозировки и имеет ограниченную растворимость и биораспределение. В сообщении о лимфоме человека и клеточной линии AML HL60 задокументирована индукция гибели клеток при лечении 3-BrPA [112–114]. Недавнее исследование описало возможное комбинаторное лечение с использованием ингибитора гликолиза (3-BrPA) и ингибитора переноса электронов в митохондриальном комплексе-III (антимицин A). Антимицин А также является мощным ингибитором цитохром-с-редуктазы. Было показано, что в качестве единственного агента антимицин А вызывает апоптоз и увеличивает скорость гликолиза [115, 116]. Когда 3-BrPA и антимицин А были объединены, наблюдалось резкое снижение уровня АТФ в раковых клетках [117]. Это исследование продемонстрировало, что острый лейкоз, по-видимому, зависит от гликолиза для выживания, и что блокада окислительного дыхания также может влиять на жизнеспособность клеток.Однако комбинированное ингибирование гликолиза и окислительного фосфорилирования привело к более значительной гибели клеток. В настоящее время неясно, приведет ли это комбинаторное лечение также к токсичности для доброкачественных клеток. Альтернативный подход к усилению цитотоксических эффектов ингибиторов гликолиза при лейкемии — это нацеливание на мишень рапамицина (mTOR) у млекопитающих, которая имеет решающее значение для клеточных реакций на метаболический стресс [118]. Путь mTOR играет важную роль в усвоении питательных веществ, регуляции энергетического метаболизма и выживании раковых клеток [118–120].Целевое ингибирование как гликолиза, так и mTOR может взаимодействовать, чтобы вызвать серьезную метаболическую дерегуляцию, гибель клеток и нарушение генерации АТФ в раковых клетках, которые в большей степени зависят от гликолиза для выработки энергии. In vitro и in vivo Исследования на клетках лейкемии и лимфомы [113, 120] продемонстрировали, что комбинация рапамицина и 3-BrOP (3-бром-2-оксопропионат-1-пропиловый эфир), проницаемого для клеток сложного эфира 3-BrPA, эффективно истощающий клеточный АТФ [121]. Более того, комбинаторный эффект вызвал дефосфорилирование последующих молекул-мишеней mTOR (т.е.е., p70S6K), что приводит к изменениям не только в клеточном метаболизме, но и в сигналах выживания. Кроме того, одновременное ингибирование гликолиза и пути mTOR является потенциально менее токсичным подходом к раковым клеткам-мишеням. Когда АТФ истощается из-за ингибирования гликолиза, блокирование пути mTOR еще больше ограничивает поглощение питательных веществ, пролиферацию и выживаемость клеток [121]. Чувствительность лейкозных клеток к комбинациям гликолитических ингибиторов, таких как 2-DG и 3-BrPA, и ингибиторов окислительного фосфорилирования (антимицин A) или пути mTOR (аналоги рапамицина) предполагает потенциальную роль комбинаторных терапевтических подходов в HMs. .Эти комбинации могут приводить к изменению не только клеточного метаболизма, но и сигнала выживания [122, 123]. Недавние открытия показали, что эффект Варбурга также присутствует при множественной миеломе (ММ) [96]. По этой причине несколько исследовательских групп пытались ингибировать гликолиз в качестве нового терапевтического подхода к этим ТМ. Недавнее исследование Fujiwara et al. [124] описали новый ингибитор гликолиза, DCA, который способствует окислению пирувата и индуцирует ингибирование роста MM.Ингибирование аэробного гликолиза DCA происходит за счет подавления PDK1, киназы, которая фосфорилирует и ингибирует PDH в митохондриях. Ингибирование PDK1 и восстановление активности PDH, индуцированное DCA, привело к увеличению поступления ацетил-КоА в цикл Кребса и донорству электронов NADH в цепь переноса электронов [98]. Повышение активности цепи переноса электронов вызывает образование митохондриальных активных форм кислорода (АФК), которые способствуют снижению потенциала митохондриальной мембраны и, в конечном итоге, подавлению пролиферации клеток. Стандартная терапия пациентов с ММ основана на бортезомибе, который вызывает сильный апоптотический ответ миеломных клеток [96]. Однако плазматические клетки могут стать устойчивыми к апоптозу, явлению, которое связано с аэробным гликолизом и предсказывает плохой клинический исход у пациентов. Fujiwara et al. описали, что комбинаторное лечение ММ бортезомибом и DCA значительно увеличивает продукцию супероксида и индуцирует апоптоз. Кроме того, авторы провели исследование in vivo на мышах с миеломой.Значительно более длительная выживаемость мышей с миеломой наблюдалась при лечении комбинаторной терапией (DCA + бортезомиб) [96] по сравнению с контрольными мышами или мышами, получавшими только монотерапию. Таким образом, ингибирование гликолиза увеличивало чувствительность клеток MM к обычной химиотерапии in vitro и улучшало выживаемость несущих миелому мышей in vivo . 22. Заключение Нацеливание на гликолиз стало потенциально новым подходом к разработке целевых методов лечения ТМ.Однако необходимы дополнительные исследования для изучения молекулярных механизмов зависимости ТМ от гликолиза и его важности для химической устойчивости. Поскольку использование клеточных линий лейкемии, лимфомы или ММ имеет определенные ограничения, такие как метаболическая адаптация и изменения скорости роста и пролиферации клеток, важно также протестировать комбинаторные стратегии с участием гликолитических ингибиторов в первичных образцах от пациентов с HMs. В случае успеха эти исследования потребуют дальнейших исследований in vivo на соответствующих моделях ТМ.Такая работа является предпосылкой для успешного перехода от таргетной терапии с использованием ингибиторов гликолиза для проведения клинических испытаний у пациентов с ТМ. Благодарности Работа в лаборатории автора поддерживается грантами FP7 Европейского Союза (ASSET, номер проекта: 259348 и LUNGTARGET, номер проекта: 259770), Швейцарским национальным научным фондом (гранты 31003A-120294 и 31003A-146464) , Fondation FORCE, Novartis Stiftung für Medizinisch-Biologische Forschung, Jubiläumsstiftung der Schweizerischen Mobiliar Genossenschaft, Stiftung zur Krebsbekämpfung, Huggenberger-Bischoff Für Medizinisch-Biologische Forschung.Заира Лени и Гита Параккал — члены Высшей школы клеточных и биомедицинских наук Бернского университета. PFK1 — PFK2 Сводка взаимодействия Фенотипическое улучшение Генетическое взаимодействие подразумевается, когда мутация или сверхэкспрессия одного гена приводит к усилению любого фенотипа (кроме летальности / дефекта роста), связанного с мутацией или сверхэкспрессией другого гена. Термины онтологии фенотип : накопление химического соединения (APO: 0000095) Связанные взаимодействия MS Взаимодействие предполагается, когда белок-приманка захватывается из клеточных экстрактов либо поликлональным антителом, либо эпитопной меткой, а связанный партнер взаимодействия идентифицируется методами масс-спектрометрии. Взаимодействие Код экспериментальных доказательств Набор данных Пропускная способность Оценка Куратор Примечания PFK Capture000 9FK Cap2 9109 Высокий — BioGRID — PFK2 PFK1 Affinity Capture-MS Affinity Capture-MS при взаимодействии представляет собой аффинность, захваченную из клеточных экстрактов либо поликлональным антителом, либо эпитопной меткой, и связанный партнер взаимодействия идентифицируется методами масс-спектрометрии. Высокий — BioGRID — PFK2 PFK1 Affinity Capture-MS Affinity Capture-MS при взаимодействии представляет собой аффинность, захваченную из клеточных экстрактов либо поликлональным антителом, либо эпитопной меткой, и связанный партнер взаимодействия идентифицируется методами масс-спектрометрии. Высокий — BioGRID — PFK1 PFK2 Affinity Capture-MS Affinity Capture-MS при взаимодействии представляет собой аффинность, захваченную из клеточных экстрактов либо поликлональным антителом, либо эпитопной меткой, и связанный партнер взаимодействия идентифицируется методами масс-спектрометрии. Высокий — BioGRID — PFK1 PFK2 Баффинити Capture-Western Affinity Capture-Western Infinity при взаимодействии представляет собой аффинность, захваченную из клеточных экстрактов либо поликлональным антителом, либо эпитопной меткой, и ассоциированный партнер взаимодействия, идентифицированный вестерн-блоттингом со специфическим поликлональным антителом или второй эпитопной меткой.Эта категория также используется, если взаимодействующий белок визуализируется непосредственно по окрашиванию красителем или радиоактивности. Обратите внимание, что это отличается от любого эксперимента по совместной очистке, включающего аффинный захват, тем, что эксперимент совместной очистки включает по крайней мере одну дополнительную стадию очистки, чтобы избавиться от потенциально загрязняющих белков. Высокий — BioGRID — PFK1 PFK2 PCA PCA A белок-фрагментный анализ (анализ комплементации белка PCA) анализ взаимодействия, в котором белок-приманка экспрессируется как слияние с одним из N- или C-концевых пептидных фрагментов репортерного белка, а белок жертвы экспрессируется как слияние с комплементарным N- или C-концевым фрагментом того же репортерного белка. .Взаимодействие белков приманки и жертвы объединяет комплементарные фрагменты, которые затем могут складываться в активный репортер, например анализ сплит-убиквитина. Низкий — BioGRID — PFK1 PFK2 Фенотипическое усиление Фенотипическое усиление мутации или гиперэкспрессия приводит к усилению любого фенотипа (кроме дефекта летальности / роста), связанного с мутацией или сверхэкспрессией другого гена. Низкий — BioGRID 2399390 PFK1 PFK2 000 Синтетическая летальность Смертельное генетическое взаимодействие делеции в отдельных генах, каждый из которых по отдельности вызывает минимальный фенотип, приводят к летальности при объединении в одной и той же клетке при определенных условиях. Низкий / Высокий — BioGRID 348083 PFK2 PFK1 000 Synthetic Rescue Rescue Rescue мутации или делеции одного гена восстанавливают летальность или дефект роста штамма, мутировавшего или удаленного для другого гена. Низкий / Высокий — BioGRID 2198688 PFK1 PFK2 Двухгибридный двухгибридный гибрид слияние ДНК-связывающего домена (DBD) и жертвы, выраженное как слияние домена активации транскрипции (TAD), и взаимодействие, измеряемое активацией репортерного гена. Высокая — BioGRID — . Last updated on 27.09.2021 alexxlab View All Posts Comments No comments yet. Why don’t you start the discussion? Добавить комментарий Отменить ответ Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены * Имя * Email * Сайт Scroll to Top